, , ,

"Поиск микроорганизмов-продуцентов протеаз и микроорганизмов, улучшающих плодородие почв". Екатерина Алексеевна Соколова, НГУ, ИХБФМ СО РАН, 19.06.2024

nsu_icbfm_easokolova_202406.pdf

Состав коллектива

Аннотация

Исследование микроорганизмов в рамках проекта велось в трех направлениях:

  1. исследование метагеномов (суммарного генома всех бактерий в образце) почв из разных мест, с целью анализа представленности и обогащенности генами разных метаболических путей, вовлечённых в механизмы стимулирования роста бактерий;
  2. исследование генома индивидуальных бактерий, показавших лучшие характеристики в лабораторных тестах, с целью поиска генов, обуславливающих эти качества;
  3. исследование состава микробиома (представленности бактерий разных родов, по возможности видов) образцов почвы после полевого эксперимента. Полевой эксперимент включал в себя посадку трех культур (пшеница, гречиха, кукуруза), семена которых были обработаны консорциумами (смесями) микроорганизмов, предварительно показавших в лабораторных тестах высокие показатели стимулирования роста растений.

Все три этапа включают в себя секвенирование нового поколения (NGS) на платформе Illumina.

Направления 1 и 2 включают в себя следующие биоинформатические анализы:

  1. Сборка генома de novo (*для метагеномов может быть выполнена только на базе кластера ввиду высоких требований к ОЗУ, не менее 500 ГБ). Выполняется программой SPAdes. С последующей оценкой качества программой MetaQuast.
  2. Поиск открытых рамок считывания. Выполняется программой MetaGeneMark.
  3. Предсказание генов путём анализа белковых последовательностей, предположительно получаемых с предсказанных открытых рамок считывания. Анализ заключается в сравнении последовательностей с базами данных. Выполняется программой InterProScan. В виду множества сравнений программа очень требовательна к ресурсам, а также к месту развертывания баз данных при локальном использовании. Использование кластера значительно облегчает процесс.

Направление 3 включает в себя бионформатический анализ 16S рРНК микроорганизмов - определение всех микроорганизмов почве до рода или вида с последующим статистических анализом представленности разных бактерий между образцами. Анализ выполнялся пакетом программ QIIME.

Финансовая поддержка

Публикации